毛细管电泳仪进样操作事项

毛细管电泳仪进样操作事项

        毛细管电泳分析对进样技术要求很高。抽样操作事项如下：
         一、采样区越小越好：
        无论采用何种取样方法，毛细管进入样品溶液的深度一般都比较小。毛细管总长度的 1% 至 2%，以*大限度地减少样品溶液通过毛细管吸附到毛细管中对进样量的影响。样品管中的溶液至少为 5 μL，进样量为 1 至 50 nL。
        二、注射时间短为宜：
        通常进样时间为0.5~1s，此时吸附在毛细管上的样品量相对于抽吸量可以忽略不计。
        虽然毛细管电泳的进样时间可达±0.1s，但有些溶液在插入样品管时不可避免地会粘附在毛细管上。如果进样时间过短，会影响分析的重复性。
        三、样品预浓缩：
        受毛细管总体积的限制，对于浓度很稀的样品，毛细管电泳不能像HPLC那样增加样品体积来提高检测灵敏度，但可以采取一些措施来提高它。
         1、当样品缓冲液的电导明显低于（100倍以上）电泳缓冲液时，在毛细管两端加电压后，样品区前后可形成较大的电场，使样品溶液中的分子可以更快地迁移。当这些分子到达电泳缓冲液边界时，由于电场减弱，迁移速度减慢，使样品面积由宽变窄，浓度增加，从而达到集中的目的。
         2.当样品缓冲液和电极缓冲液的电导相同，且样品浓度比较稀，不适合进一步稀释时，可以在注入样品前吸入一些水，同样可以达到目的的浓度。
        无论采用何种进样方式，上述方法都能浓缩样品堆栈。但是，由于聚集区的电位突然下降，该区的温度会升高。
         4. 毛细管插入样品溶液后，应立即开始进样操作，然后迅速移至缓冲液开始电泳。否则，会发生毛细作用和虹吸作用，导致误差并加宽光谱带。
         5. 电极不得与毛细管接触，样品槽和缓冲槽的液面高度应保持平衡。
        六。尽可能保持系统恒定。因为温度直接影响粘度，它影响恒定的注射量。
        七、样品溶液中的溶剂必须与缓冲液混溶，且前者的离子强度应低于后者。
         8.防止样品溶液和缓冲液的蒸发和损失。